COLORACIÓN DE ZIEHL-NEELSEN 
               USO PRETENDIDO: 
               Sistema para coloración de bactérias Alcohol-ácido resistentes en frotis de material 
               recogido en las diversas áreas del organismo y frotis de medio de cultivo. 
                
                
                
               PRINCÍPIO: 
               Las microbactérias presentan grande cantidad de lípidos en sus paredes celulares. 
               Cuando tratadas por el colorante Fucsina Fenicada, se coloran de rojo y persisten a la 
               decoloración posterior por una solución de Álcohol-ácido fuerte (diferenciador). Por 
               ese motivo son conocidas como Bacilos Álcohol-Ácido Resistentes (BAAR). Las otras 
               bactérias, que no tienen tales paredes celulares ricas en lípidos, tienen su coloración 
               por la Fucsina decolorada por la solución de Álcohol-ácido y se coloran en azul por la 
               coloración de fondo del Azul de Metileno (contra colorante). 
                
                
                
               REACTIVOS Y PRESENTACIÓN: 
               1.  Solución de Fucsina Fenicada a 0,5% --------- 500 mL  
               2.  Solución de Álcohol-Ácido a 3 % ---------------- 500 mL  
               3.  Solución de Azul de Metileno a 0,3 % ---------- 500 mL 
                
               PRESENTACIÓN: 3 Frascos de 500mL 
                
                
                
               ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS: 
               Los  colorantes  deben  ser  mantenidos  en  el  frasco  original,  bien  sellado,  en 
               temperatura ambiente y al abrigo de la luz. 
                
                
                
                
              CUIDADOS Y PRECAUCIONES: 
              Las soluciones colorantes son para uso diagnóstico “in vitro”. Su manipulación debe 
              ser cuidadosa, evitando el contacto con la piel y mucosas. En caso de contaminación 
              accidental lavar el área afectada en água corriente. El descarte del material utilizado 
              debe  ser  hecho  obedeciendo  los  criterios  de  bioseguridad  establecidos  por  el 
              laboratório. 
              Excepto las manchas provocadas por los colorantes, el producto no ofrece riesgo al 
              medio ambiente o personas, dentro de las normas y condiciones de uso. 
              Mantener lejos del fuego y calor. 
               
               
               
              MUESTRAS: 
              Frotís hechos partir de colónias bacterianas. Frotís de secreciones de las más diversas 
              partes del organismo. Frotís del sedimento urinário. 
              Todas  las  muestras  biológicas  deben  ser  consideradas  como  potencialmente 
              infectantes. 
               
               
               
              PROCEDIMIENTO TÉCNICO: 
              1.  Fijar el frotis; 
              2.  Poner las láminas en el soporte de coloración; 
              3.  Cubrir las láminas con Fucsina de Ziehl; 
              4.  Calentar las láminas por 5 minutos, permitiendo la salida de vapores y evitando la 
                ebullición de la fucsina; 
              5.  Luego 5 minutos, escurrir y lavar las láminas delicadamente con água; 
              6.  Decolorar  las  láminas  con  solución  de  álcohol-  ácido  hasta  que  se  quede 
                completamente clara; 
              7.  Lavar las láminas con água corriente; 
              8.  Colorar con Azul de Metileno por 1 minuto; 
              9.  Lavar con água corriente y secar. 
               
               
              INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS:  
               
              Las bactérias ácohol-ácido resistentes se presentan de color rosa a rojada. Las demás 
              bactérias (no álcohol-ácido resistentes), elementos celulares y desechos, se coloran 
              en azul por la solución de azul de metileno. 
               
               
              MATERIALES NECESARIOS NO OFRECIDOS: 
              1.  Soporte para coloración; 
              2.  Láminas. 
              3.  Boquilla de Bunsen 
               
               
               
              CONTROL DE CALIDAD: 
              Antes  de  seren  liberadas  para  consumo  las  matérias  primas  y  los  reactivos  son 
              evaluados por el Laboratório de Control de Calidad de la Renylab. 
              La  limpieza  y  secado  adecuado  del  material  a  ser  utilizados  son  de  fundamental 
              importancia para la estabilidad de los reactivos y obtención de resultados correctos. 
              No usar detergentes hechos de fosfato. El água usada en la limpieza del material debe 
              ser  de  buena  calidad.  Las  láminas  utilizadas  deben  ser  completamente  límpias, 
              exentas de gordura. 
               
               
               
              CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO: 
              Repetitividad: fueron hechas pruebas con el colorante bacteriológico en 15 frotis de 
              esputos  de  pacientes  con  tuberculosis.  Paralelamente  15  frotis  de  secreción  de 
              orofaringe  fueron  colorados  con  el  colorante.  Se  observó  que  la  repetitividad  se 
              relaciona con el correcto seguimiento de las instrucciones de uso, siendo decisivas las 
              etapas de fijación, los tiempos de coloración y la temperatura de calentamiento de la 
              fucsina. 
              Reproductividad:  Por  6  meses  seguidos  fueron  realizadas  pruebas  en  frotis  de 
              culturas de bacilos álcohol-ácido resistentes, usandose el mismo lote del producto. Por 
              todo  el  período,  hubo  concordancia  de  las  características  tintóreas  de  los  bacilos 
              BAAR y de los bacilos no álcohol-ácido resistentes. 
               
               
               
              BIBLOGRAFIA: 
              1.  Otto  Bier:  Bacteriologia  e  imunologia,  19  edição,  1978.  Who:  Manual  of  basic 
                 techniques for a health laboratory, 1980. 
              2.  Stanley S. Raphael: Lynch: Técnicas de laboratório, 1986. 
               
               
               
          
         DOCUMENTO DE GARANTÍA: 
          
         La RenyLab Química e Farmacêutica garantiza el cambio de este conjunto 
         diagnóstico, siempre que el conjunto esté dentro de la fecha de caducidad y sea 
         comprobado por su Asesoría Técnica que no hubo fallos en la aplicación, 
         manipulación y conservación de este producto.  
         La RenyLab y sus distribuidores no se responsabilizan por fallos en el rendimiento del 
         conjunto bajo estas condiciones. 
          
         RenyLab Química e Farmacêutica Ltda 
         Rodovia BR 040 km 697 Caiçaras 
         RUC / NIT / RUT: 00.562.583/0001-44 
         CEP 36.205-666 - Barbacena – MG - Brasil 
         Teléfono (+55 32) 3052-7746 / 3331-4489 
         Responsable técnico: Renê Vaz de Mello 
         CRF-MG: 2709 
         www.renylab.ind.br 
         Registro en el Ministério de la Salud: 80002670066