TEKNOLOGI  DNA REKOMBINAN
                  (RECOMBINANT DNA TECHNOLOGY)
                            IDA  SRI  ISWARI
                     RSUP SANGLAH, DENPASAR-BALI
          KEMENENTERIAN KESEHATAN   REPUBLIK INDONESIA
                               DAFTAR ISI
             DAFTAR ISI                               i
                       BAB I        PENDAHULUAN                                                 1
                       BAB II       TEKNOLOGI  MOLEKULER DNA                             3
                       2.1          Polymerase Chain Reaction (PCR)                             3
                           2.1.1    Reverse Transcription-PCR (RT-PCR)                          7
                       2.1.2        PCR-Single-Strand konformasi Polymorphism (PCR-SSCP)         8
                       2.1.3        The Ligase Chain Reaction (LCR)                             10
                       2.2          Kloning                                                     12
                       2.2.1        Kloning cDNA                                                13
                       2.2.2.       Kloning Genom                                               15
                       2.2.3        Kloning DNA genom pada Vektor YAC                    17
                       2.2.4        Analisis Produk Kloning                                     20
                       2.3          Analisis Restriction Fragment Length Polimorphism (RFLP)    21
                       2.4          Sekuensing DNA (DNASequencing)                       24
                       2.5          Analisis microarray                                         27
                       2.6          Transgenesis                                                28
                       2.7          Terapi gen                                                  29
                       BAB III      RINGKASAN                                                   37
                       DAFTAR  PUSTAKA                                                          38
                                                             i
                                                       BAB I
                                                  PENDAHULUAN 
                            
              Biologi molekuler merupakan suatu bidang ilmu kedokteran yang berkembang 
           dengan pesat sejalan dengan perkembangan ilmu pengetahuan dan teknologi saat ini. 
           Perkembangan ini menyebabkan perubahan yang mendasar didalam penelusuran dan 
           penjabaran  ilmu  kedokteran.  Hal  ini  merupakan  kesempatan  untuk  para  ilmuwan 
           menerapkan bidang ilmu biologi molekuler   secara penuh dan berkesinambu-ngan, 
           terutama untuk mendapatkan suatu langkah maju dalam hal diagnostik, preventif dan 
           bahkan dipakai sebagai alat pengukuran epidemiologi dari penyakit infeksi tersebut.
              Beberapa  tehnik  dibidang  biologi  molekuler  yang  mendasar  telah 
           dikembangkan untuk melacak adanya urutan DNA yang spesifik dari mikroorganisme 
           tertentu yang mana hal ini memungkinkan untuk dipakai sebagai sarana diagnostik. 
           Tehnik tersebut lazimnya disebut dengan Polymerase Chain Reaction (PCR), dimana 
           saat ini dipakai sebagai sarana diagnostik dan skrining pada penderita infeksi maupun 
           non infeksi (Cox, T.M. 1997, Sikora K, 1991).
                 Terapi  modern  menggunakan  molekul  meliputi  pemanfaatan  dari 
           berbagai  teknik biologi molekuler dalam analisis penyakit, penyakit gen dan fungsi 
           penyakit gen (Lever, A.M.L. 1997). Studi tentang penyakit bawaan dan fungsi gen 
           dalam individu telah dimungkinkan oleh perkembangan DNA rekombinan dan teknik 
           kloning  (Lever,  A.M.L.  1997;  Glick,  B.R.  dan  Pastenak,  J.J.  1994  ).  Dasar  DNA 
           rekombinan  merujuk  pada  merekombinasi   fragmen  DNA  yang  berbeda.  Kloning 
           mengacu pada proses penyusunan beberapa salinan (copy) molekul DNA. Mekanisme 
           klasik untuk memproduksi molekul rekombinan melibatkan penyisipan fragmen DNA 
           eksogen   (circular  double  stranded  DNA)  berasal  vektor  plasmid  atau  bakteriofag 
                         (virus yang menginfeksi bakteri) berbasis vektor (Gaspar, HB. Dan Kinnon, C. 1991). 
                         Vektor  merujuk  pada  molekul  DNA  digunakan  untuk  membawa  atau  mengangkut 
                         DNA yang diinginkan ke dalam sel (Cox, T.M. 1997; Gaspar, HB. Dan Kinnon, C. 
                         1991).
                                Pada  bab  pembahasan  akan  di  uraikan  secara  singkat  teknik-teknik  biologi 
                         molekuler yang sering digunakan untuk mendiagnosis suatu penyakit seperti dan terapi 
                         gen sebagai sarana untuk pengobatan penyakit di masa yang akan datang.
                                                            BAB II
                                            TEKNOLOGI  MOLEKULER DNA
                         2.1    Polymerase Chain Reaction (PCR) 
                                PCR adalah teknik yang kuat digunakan untuk memperkuat DNA jutaan kali 
                                lipat,  dengan  replikasi  berulang  template,  dalam  waktu  singkat.  Proses  ini 
                         menggunakan set tertentu  dalam vitro  oligonukleotida  sintesis  untuk  sintesis  DNA 
                         prima. Desain primer tergantung pada urutan DNA yang diinginkan untuk dianalisis.