Southern Blot (1975)
  • Bu  yöntemde  izole  edilen  DNA  uygun  bir 
   restriksiyon enzimi ile kesilir ve belirli sayı ve 
   uzunlukta  DNA  frangmentlerinin  oluşumu 
   sağlanır. Agaroz jel elektroforez yöntemi ile jel 
   üzerinde  büyüklüklerine  göre  birbirinden 
   ayrılan  bu  fragmentler  önce  yüksek  pH  ile 
   denatüre  edilip  blot  yöntemi  ile  nitroselüloz 
   filtre üzerine geçirilir. 
                   Southern Blot (1975)
     • 32
         p (ya da başka bir radyoaktif olmayan nükleotit 
        analoğu)      ile    işaretli    denatüre       edilmiş     ve 
        incelenecek  bölgeye  özgü  prob,  filte  üzerinde 
        tutulan fragmentler ile uygun koşullar sağlanarak 
        hibridize edilir. Sonra filtre üzerine bir röntgen filmi 
        konularak otoradyografi işlemi gerçekleştirilir. Prob 
        yalnızca  kendisine  tümleyici  bazları  içeren  DNA 
        fragmenti  ile  hibridize  olacak  ve  otoradyogram 
        sonucu bu bandın üzerinde gözlenebilecektir.
        Western Blot
  • Western blot, moleküler biyolojide, bir protein 
   solüsyonunda, aranan bir proteinin olup 
   olmadığını ve varsa ne kadar olduğunu 
   anlamak için kullanılan bir yöntemdir. Özellikle 
   HIV (+) bulunan örneklerin doğrulanmasında 
   başvurulur.
                    Western Blot
    • Sds-page uygulandıktan sonra, elektro blotting 
      yöntemiyle proteinler bir membrana geçirilir. 
      Daha  sonra  çeşitli  solüsyonlarla  işleme  tabi 
      tutulan  membrandaki  proteinlere  spesifik 
      antikorlar  bağlanır.  Bu  antikorların  tespit 
      edilmesiyle  proteinin  olup  olmadığı,  çıkan 
      bantların    kalınlığının  kontrol    bantlarıyla 
      karşılaştırılmasıyla da ne kadar olduğu anlaşılır.